高氧对新生大鼠肺caspase-3和p53基因表达及肺细胞凋亡的影响

• 作者: 刘皖君 宁琴 廖玲洁 李玉祥 罗小平
• 来源期刊: 中华儿科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞凋亡 高氧症 肺疾病 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 基因 p53
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 585-590
• 页数: 6页
• 分类号: R72
• 字数: 5033字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0578-1310.2005.08.008

摘要

目的探讨高氧对新生大鼠肺caspase-3和p53基因表达及肺细胞凋亡的影响.方法采用Spraque-Dawley新生大鼠95%氧气暴露建立高氧肺损伤模型.应用RT-PCR技术检测肺组织caspase-3 mRNA 和p53 mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相分析结果.计算目的基因PCR产物条带与内参照β-actin条带光密度值的比值,作为p53基因的相对表达量,结果以±s标记,而caspase-3 mRNA表达量则以阳性表达或阴性表达为标记.应用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术(TUNEL)原位检测细胞凋亡. 光镜下随机计算5个视野中500个肺细胞中的阳性细胞数,结果以±s标记.结果新生大鼠暴露于95%氧浓度环境中24 h后肺组织中p53 mRNA表达中度增加(q=3.2305,P＞ 0.05),48 h后表达显著增加,与空气对照组相比差异有统计学意义(q=7.2941,P< 0.05).新生鼠高氧处理72 h、96 h后, 肺组织p53 mRNA表达又恢复到正常水平.在各空气对照组和各高氧处理组中个别新生鼠肺的caspase-3 mRNA有微量表达,绝大多数新生鼠肺的caspase-3 mRNA没有表达,差异无统计学意义.95%氧暴露7天的新生鼠肺细胞凋亡水平明显高于空气暴露组新生鼠肺细胞凋亡水平,两者比较差异有极显著的统计学意义(F=100,P<0.001).结论在高浓度供氧下,肺组织通过暂时上调p53基因的表达,介导细胞周期停滞,阻止G0/G1期细胞进入S期,抑制细胞分裂、增殖,同时p53促进细胞凋亡,从而导致肺生长发育受阻和肺损伤.新生鼠暴露于95%氧环境中,肺组织caspase-3 基因基本上不表达,因此推测高氧肺细胞凋亡可能存在不经过caspase-3的凋亡途径.