直标鼠抗人CD14单克隆抗体2F9-FITC的研制及鉴定

• 作者: 宁铂涛 宋华 张玲燕 徐卫群 杨世隆 汤永民 沈红强 石淑文 钱柏芹 陈英虎
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,单克隆 抗原,CD14 异硫氰酸荧光素 白血病
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 167-171,190
• 页数: 6页
• 分类号: R392|R733
• 字数: 3937字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.02.015

摘要

目的:研制异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的直标单克隆抗体2F9-FITC,用于白血病的免疫分型诊断.方法:2F9杂交瘤细胞的亚克隆,2F9腹水的制备、纯化、纯度鉴定按照常规方法进行;参考改良Marsshall氏法,制备FITC标记的2F9-FITC单抗;通过流式细胞术鉴定单抗亚型,比较2F9-FITC和标准CD14-FITC在不同类型白血病细胞上的表达情况.结果:制备了大量高纯度的IgG1κ亚型2F9单抗,成功研制了直标单抗2F9-FITC,A495/A280比值为0.44;2F9-FITC与CD14-FITC在单核细胞上反应的阳性细胞百分数分别为84.50%及90.08%,而在淋巴细胞仅为0.52%和1.01%;2F9-FITC与标准CD14-FITC在各类白血病细胞上的阳性细胞百分数的差异不显著(n=23,t=0.922,P=0.367).结论:研制的2F9-FITC能够替代进口的同类高质量单抗试剂,用于单核细胞相关性白血病的免疫诊断.