少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 孙颖 张琦 张飚 李明春 邢来君 陈有为
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 少根根霉 △6-脂肪酸脱氢酶基因 γ-亚麻酸 巴斯德毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 871-877
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.004

摘要

△6-脂肪酸脱氢酶是一种膜整合蛋白,也是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶.在前期工作中,通过RT-PCR和RACE技术,从少根根霉NK300037中克隆到一个潜在编码△6-脂肪酸脱氢酶的序列,序列和功能分析结果表明该序列具有一个长度为1377bp、编码由458个氨基酸组成、大小为52kD的新的△6-脂肪酸脱氢酶基因.把少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)亚克隆到表达载体pPIC3.5K,构建重组表达载体pPICRAD6,并转化到毕赤酵母菌株GS115进行表达.提取酵母细胞总脂肪酸和进行甲酯化,经气相色谱和气相色谱-质谱连用分析表明,目的基因的编码产物能将C16:1、C17:1、C18:1、亚油酸和α-亚麻酸在△6和7位间特异性脱氢而引入一个新的双键,生成更高不饱和的脂肪酸,该催化反应没有链长特异性,只有键位特异性.此外,按Kozak序列特点,改变目的基因转译起始密码子周边序列结构,并把改变后序列导入毕赤酵母GS115中进行功能表达分析,结果表明在毕赤酵母中这种改变同样能提高目的基因的表达水平.综合所有分析结果表明,巴斯德毕赤酵母更适合用来综合分析△6-脂肪酸脱氢酶基因的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张飚		2	21	2.0	2.0