5株鼠抗人CD28单克隆抗体的研制及生物学特性的研究

• 作者: 孙中文 张学光 於葛华 石云杰 邱玉华 陆艳红 陶然
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD28 杂交瘤 单克隆抗体 增殖效应 协同刺激分子
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 406-410
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4560字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体,研究其对T细胞活化、增殖及信号转导等方面的生物学效应.方法:以天然高表达CD28分子的人多发性骨髓瘤细胞株U266和小鼠淋巴瘤细胞转人CD28基因细胞株CD28-T分别作为免疫原和检测细胞株,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行单抗的研制;以快速定性试纸法鉴定单抗亚类;腹水诱生法和免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化;经间接免疫荧光法分析单抗对不同细胞膜表面CD28分子的识别;采用竞争抑制法分析单抗识别的抗原位点;利用3H-TdR掺入法分析单抗对PBTC的刺激效应和免疫荧光法分析PBTC活化前后的表型变化.结果:成功获得5株鼠抗人CD28功能性单克隆抗体,分别命名为2D5、2F5、3B6、3F8和8G8,其中2D5为IgG2a亚类,其余均为IgG1亚类;流式细胞仪分析结果显示,5株单抗均能良好识别CD28-T、U266、XG1和Jurkat细胞表面的CD28分子;竞争抑制试验表明,2D5和8G8能完全阻断标准抗人CD28单抗与U266膜CD28分子的结合,其余3株为部分阻断;3H-TdR掺入法实验结果表明,单抗8G8联合激发型CD3单抗能明显促进PBTC的增殖,刺激指数为7.4,活化细胞CD4、CD25、ICOS、41BB及OX40分子的表达上调.结论:5株单抗均为抗人CD28单克隆抗体,具有重要的基础研究及潜在的临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	於葛华	苏州大学生物技术研究所	52	285	11.0	14.0
3	孙中文	苏州大学生物技术研究所	16	134	7.0	11.0
4	邱玉华	苏州大学生物技术研究所	89	426	11.0	15.0
5	石云杰	苏州大学生物技术研究所	7	54	5.0	7.0
6	陶然	苏州大学生物技术研究所	13	37	3.0	6.0
7	陆艳红	苏州大学生物技术研究所	3	36	3.0	3.0