Lewis大鼠骨髓间充质干细胞分离培养和鉴定

• 作者: 杨进 林群 郑辉哲 雷立华 韩涛
• 来源期刊: 福建医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠,近交Lew 细胞分离 细胞培养 干细胞 骨髓细胞 细胞周期 细胞分化
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 360-363
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3648字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4194.2005.04.004

摘要

目的建立从Lewis大鼠骨髓中分离、培养间充质干细胞的方法,并对分离、培养的间充质干细胞进行鉴定.方法采用Percoll(1.073g/L)密度梯度分离和贴壁培养相结合的方法分离培养Lewis大鼠的骨髓间充质干细胞(MSC).MSC细胞鉴定:采用相差显微镜观察MSC的形态学特征;流式细胞仪检测细胞表面标志抗原CD29,CD90,CD34和CD45的表达率;苏丹Ⅳ染色检测MSC成脂细胞分化;碱性磷酸酶染色和茜素红染色检测MSC成骨分化.结果原代培养的MSC于24 h后贴壁,48～72 h形成集落,12～15 d可达到80%～90%融合.第1代细胞表面标记物CD29,CD90,CD34和CD45的阳性率分别为80.41%,66.27%,2.73%,0.74%.第3代细胞表面标记物CD29,CD90,CD34和CD45的阳性率分别为89.91%,88.17%,0.81%,0.17%.细胞周期分析显示,第5代细胞G0/G1期细胞占68.9%,S+G2+M期为31.1%.用α-MEM培养液培养的第6代细胞部分分化为成骨和成脂细胞.结论采用Percoll(1.073g/L)密度梯度分离和贴壁培养相结合的方法能够成功分离和培养大鼠的MSC.第5代MSC细胞保持分化潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨进	福建医科大学附属口腔医院种植中心	15	63	4.0	7.0
2	雷立华	福建省立医院心血管研究所心外科	14	80	5.0	8.0
3	林群	福建医科大学附属第一医院麻醉科	55	245	9.0	12.0
4	韩涛	福建省立医院心血管研究所心外科	80	257	7.0	12.0
5	郑辉哲	福建省肿瘤医院麻醉科	16	47	4.0	6.0