人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用

• 作者: 张胜权 徐从贞 罗欣 陈兵 鲁云霞
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素21 克隆表达 T细胞增殖
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 22-24
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2851字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人细胞因子IL-21表达载体并在Hela细胞中稳定表达,分析rhIL-21体外促T细胞增殖作用.方法:以已构建的pMD-IL21为模板,PCR扩增成熟IL-21 cDNA的编码框序列并构建到真核表达载体pCDNA3.1/hismyc-B中.挑出阳性克隆进行扩增,脂质体转染入Hela细胞中并以G418加压筛选.有限稀释法、RT-PCR及Western blot筛选出稳定表达的细胞株.培养上清液经金属离子螯合层析分离纯化后,SDS-PAGE、Western blot鉴定.MTT法测定其与抗CD3单克隆抗体共刺激T细胞增殖活性.结果:SDS-PAGE、Western blot显示Mr为18 000的带有myc重组人IL-21融合蛋白(rhIL-21);并成功地获得hIL21稳定表达细胞株.rhIL-21融合蛋白具有与抗CD3抗体共刺激T细胞增殖作用.结论:获得具有生物学活性的rhIL-21细胞因子,为进一步研究其功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗欣	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	41	130	6.0	8.0
2	张胜权	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	64	295	8.0	14.0
3	陈兵	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	28	94	5.0	7.0
4	鲁云霞	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	48	229	8.0	12.0
5	徐从贞	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	15	74	4.0	7.0