核转录因子-kB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-kB激活机制的探讨

• 作者: 张圣道 李磊 毛恩强 汤耀卿 瞿洪平 纪玉宝
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 炎症 核因子-κB 圈套 细胞因子 脂多糖
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 248-251
• 页数: 4页
• 分类号: R675.5
• 字数: 3093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9610.2005.03.016

摘要

目的:观察核转录因子(NF)-κB圈套(decoy)对脂多糖(LPS)刺激后人脐静脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用,并就其作用机制进行探讨.方法:获取和培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),平均分成4组.NF-κB-圈套组和错配-圈套组分别预先以NF-κB-圈套-Lipofectamine2000复合物和错配-圈套-Lipofectamine2000复合物(对照组)处理,LPS组和对照组分别加入同体积的培养液,观察荧光标记DNA转染细胞情况.用10μg/ml LPS刺激2 h激活NF-κB,收集细胞,分别提取细胞核蛋白,检测不同组NF-κB活性以及P65和P50亚基蛋白质含量.结果:转染5 h后大于90%细胞核内可观察到绿色荧光.NF-κB-圈套组NF-κB P65亚基活性显著低于错配-圈套组和LPS组,但P65和P50亚基蛋白质含量两组之间无显著差异.结论:NF-κB-圈套能抑制细胞核内NF-κB的DNA结合活性,这一作用可能是NF-κB-圈套转入细胞核后占据转录因子核定位区的结果.