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兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察
兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察
作者:
周强
李起鸿
石国华
许建中
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
肋软骨
细胞分离
软骨细胞
组织工程
摘要:
目的观察三步酶消化法分离兔原代肋软骨细胞的效果和收获效率,并观察其体外传代培养的生物学特性.方法三步酶消化法设计为以培养液配制的1g/L胰蛋白酶/1g/L EDTA、1g/L透明质酸酶和2g/LⅠ型胶原酶顺序消化肋软骨分离细胞,检测细胞收获效率和存活率;体外传代培养观察细胞形态、生长及胞外基质中Ⅰ型和Ⅱ型胶原、蛋白多糖聚集体等的变化.结果①肋软骨经三步酶消化软骨基质逐步解离和降解,细胞被完全分离,每克软骨的细胞收获量平均为4 295.7×104个细胞,细胞存活率平均为97.2%.②原代和第1代细胞附壁生长呈三角形或多角形,生长融合时呈卵圆形,Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝异染反应均呈阳性,原代细胞外基质有高的硫酸糖胺多糖含量为(80.61±11.40)μg/cm2;第3代后细胞逐渐变为梭形,Ⅱ型胶原免疫组化为阴性,甲苯胺蓝异染反应亦明显减弱,第4代细胞外基质的硫酸糖胺多糖含量为(44.74±10.18)μg/cm2.结论①三步酶消化法能完全消化降解肋软骨基质,使细胞完全分离,并具有高细胞收获率和高细胞存活率.②原代和第1代肋软骨细胞具有良好的生物学活性.
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软骨
三维培养
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细胞,培养
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文献信息
篇名
兔原代肋软骨细胞的三步酶消化法高效分离及体外培养观察
来源期刊
第三军医大学学报
学科
医学
关键词
肋软骨
细胞分离
软骨细胞
组织工程
年,卷(期)
2005,(16)
所属期刊栏目
专题报道:骨组织工程
研究方向
页码范围
1667-1670
页数
4页
分类号
R329.2
字数
5003字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2005.16.013
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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第三军医大学学报
主办单位:
第三军医大学
出版周期:
半月刊
ISSN:
1000-5404
CN:
50-1126/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
邮发代号:
78-91
创刊时间:
1979
语种:
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
总被引数(次)
97850
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英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
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http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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