快速蛋白液相色谱系统阴离子交换层析纯化人抗地高辛单链抗体

• 作者: 刘德新 吕杨 李小鹰 李茹香 王文英 薜辉 陈瑞晗 颜光涛
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 大肠杆菌 地高辛
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 253-255
• 页数: 3页
• 分类号: R378.21
• 字数: 2127字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2005.04.005

摘要

目的:将快速蛋白液相色谱系统(FPLC)与阴离子交换层析相结合,探索在大肠杆菌(E.coli)分泌表达的人抗地高辛(Dig)单链抗体(ADAscFv)的纯化条件. 方法:①通过培养E.coli HB2151将人ADAscFv分泌表达至培养基中,离心制备培养基上清;②加入硫酸铵,收集其饱和度为0～50%的组分即为初步纯化的人ADAscFv;③将阴离子交换色谱柱与FPLC相连接后上样,分别采用含NaCl的Tris-HCl缓冲液进行线性浓度梯度洗脱及阶梯浓度梯度洗脱,紫外分光光度计自动检测洗脱峰;④通过ELISA及SDS-PAGE分别分析回收样品中人ADAscFv的抗原结合活性及纯度.结果:①2种洗脱方法均有6个洗脱峰;② ELISA显示,第2个洗脱峰回收样品中的抗原结合活性最高;③SDS-PAGE显示,第2个洗脱峰回收样品呈现与人ADAscFv分子量相符的单一条带.结论:该方法能有效地纯化在E.coli分泌表达的人ADAscFv.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李茹香	山西医科大学附属医院老年心内科	31	144	7.0	10.0
2	李小鹰	解放军总医院南楼六科	405	2442	23.0	32.0
3	颜光涛	解放军总医院基础研究所生物化学研究室	148	624	12.0	15.0
4	刘德新	解放军总医院南楼六科	13	165	5.0	12.0
5	吕杨	解放军总医院肾病科实验室	25	115	6.0	9.0
6	王文英	解放军总医院南楼六科	6	20	3.0	4.0
7	陈瑞晗	解放军总医院南楼六科	5	15	3.0	3.0