小鼠肝脏磷酸化蛋白质组的二维液相色谱分离

• 作者: 刘亚伟 姜勇 杨丽萍 陈腾祥 黎永明
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 磷酸化蛋白质组 色谱聚焦 反相高效液相色谱 二维液相色谱分离
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1033-1037
• 页数: 5页
• 分类号: Q816
• 字数: 3406字
• 语种: 中文

摘要

目的利用二维液相色谱法分离小鼠肝脏磷酸化蛋白质组.方法取正常小鼠肝脏,裂解肝脏后利用磷酸盐金属亲和层析(PMAC)树脂提取磷酸化蛋白.将磷酸化蛋白用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,再将一维收集的pH值在8.5至4.0之间的组分分别进行二维无孔硅胶反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离.最后利用ProteoVue软件将二维UV图转换成胶图进行分析.结果成功提取了小鼠肝脏磷酸化蛋白,并在浓缩除盐后通过二维液相色谱分离成功建立小鼠肝脏磷酸化蛋白质组pI/UV图谱.其中,一维色谱聚焦分离pH值在8.5至4.0之间共收集16个组分,每个组分的二维UV图转换成pI/UV胶图.结论磷酸化蛋白纯化技术与二维液相色谱技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为下一步鉴定和研究磷酸化蛋白的功能打下了基础.