VEB-3型与VEB-1型超广谱β-内酰胺酶生化特性的比较

• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β-内酰胺酶 VEB-3 酶动力学
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 细菌耐药
• 页码范围: 855-858
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3782字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.10.024

摘要

目的研究VEB-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的生化特性,并与VEB-1型ESBL进行比较.方法将blaVEB-3和blaVWEB-1基因连接至pET28a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,分别挑选blaVEB-3或blaVEB-1阳性表达的菌落测定β-内酰胺类抗生素对其最低抑菌浓度(MIC),同时提取酶蛋白进行等电点和酶动力学分析.结果 VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等电点(pI=7.45),但两者的酶动力学性质存在一定的差异:对头孢他啶和头孢噻肟,VEB-3较VEB-1表现出更高的亲和力,两者Km相差一倍左右;对头孢噻吩,VEB-1比VEB-3更具亲和力;而对阿莫西林,VEB-1型ESBL表现出很高的亲和力,而VEB-3仅有低的亲和力,两者Km相差20多倍.结论 VEB-3和VEB-1型ESBL具有相同的等电点,不同的动力学参数,blaVEB-1基因中Leu56→Phe突变可能导致了两者酶动力学性质的差异.