抗钠-钙交换体α-1和α-2重复序列抗体的制备和纯化

• 作者: 吴博威 封启龙 范国权 赵嘉惠 赵画晨
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 钠-钙交换体 α-1重复序列 α-2重复序列
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 395-398
• 页数: 4页
• 分类号: R33-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2005.04.001

摘要

目的用人工合成的钠-钙交换体α-1和α-2重复序列作为抗原,制备并纯化抗α-1和α-2重复序列抗体.方法通过主动免疫大鼠,获得抗血清.采用酶联免疫吸附测定法(SA-ELISA) 测定抗体滴度,并将高滴度抗血清(≥1∶640)上样至HiTrap Protein G HP 进行亲和层析对抗体进行纯化.纯化效果用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,并采用Bradford蛋白质定量法对纯化后抗体进行定量.结果大鼠经主动免疫后,抗α-1抗血清滴度从免疫前的1∶(25.5±1.5)升高到1∶(905.1±2.2)(P＜0.01);抗α-2抗血清滴度从免疫前的1∶(26.4±1.5)升高到1∶(1 076.3±2.0)(P＜0.01).纯化后的抗α-1和抗α-2重复序列抗体电泳时都仅有一条带出现,分子量160 kDa左右,与IgG标准品相一致.用Bradford蛋白质定量法测得抗α-1和α-2抗体浓度分别为1.0 mg/ml和1.2 mg/ml. 结论本研究获得了高纯度、高滴度的抗α-1抗体,为下一步对其进行功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵嘉惠	山西医科大学医学实验中心	23	248	5.0	15.0
2	吴博威	山西医科大学生理学教研室	82	488	11.0	19.0
3	封启龙	山西医科大学生理学教研室	13	37	3.0	5.0
4	范国权	山西医科大学微生物与免疫学教研室	24	77	5.0	7.0
5	赵画晨	山西医科大学生理学教研室	7	49	4.0	7.0