氟哌啶醇在K562/Dox细胞中对P-糖蛋白及氯离子通道的影响

• 作者: 吴德政 周京红
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 氟哌啶醇 多药耐药 K562/Dox细胞 氯离子通道
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-3766.2005.02.005

摘要

目的探讨氟哌啶醇(Hal)对人红白血病耐药细胞K562/Dox的逆转耐药作用,以及对P-糖蛋白(P-gp)和肿胀激活的氯离子通道的影响.方法应用乳酸脱氢酶法(LDH),测定Hal对瘤细胞增殖的抑制作用.以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分析经Hal处理后3种耐药基因mRNA表达的变化.将瘤细胞荷载氯离子敏感染料MQAE后,以荧光分光光度计测定低渗环境中Hal对K562/Dox细胞肿胀激活的氯离子通道的影响;应用ZM库尔特血球计数仪及256频道测定仪,测定低渗环境中瘤细胞的体积变化,以判断Hal对细胞调节性体积减小(RVD)的影响.结果 Hal对K562/Dox细胞的耐药性具有明显的逆转作用,在12.50,6.25和3.12μmol/L浓度时,其对K562/Dox细胞耐药性的逆转倍数分别为8.61,4.35和2.25.RT-PCR结果显示,用12.μmol/L Hal处理K562/Dox细胞后,P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA表达水平均降低,并呈现时间依赖性,分别较原水平下降76.3%和64.6%(P＜0.05);谷胱甘肽硫转移酶π(GSTπ)mRNA的表达水平于用药后第2天下降66.1%,第3天回升(P＜0.05).K562/Dox细胞的氯离子浓度检测结果显示,单纯低渗刺激可使K562/Dox细胞中MQAE荧光强度下降(34.46±5.91)%;经6.μmol/L和18.7μmol/L Hal处理后,细胞荧光强度分别降低(24.43±3.25)%和(16.63±4.98)%,与单纯低渗刺激比较,差异有统计学意义(P＜0.01).单纯低渗刺激时,RVD率为(84.95±5.69)%;经6.μmol/L和18.75μmol/L Hal处理后,RVD率分别为(51.12±6.01)%和(39.51±4.79)%,与单纯低渗刺激比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Hal具有较强的逆转K562/Dox细胞耐药性的作用;可抑制P-gp基因的表达和氯离子通道的活性;P-gp和肿胀激活的氯离子通道在耐Dox的K562/Dox细胞中密切相关.