人类白细胞抗原B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达

• 作者: 丁海明 吕厚山 王东 蒋东芳 陈占昆
• 来源期刊: 中华风湿病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠,转基因 β2微球蛋白 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1007-7480.2005.06.001

摘要

目的研究人类白细胞抗原(HLA)-B2704基因在转基因小鼠中的整合与表达.方法应用显微注射技术将HLA-B2704基因注入C57BL/6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F0代受精卯,出生动物进行聚合酶链反应(PCR)筛选及Southern杂交鉴定.阳性者进行反转录(RT)-PCR和流式细胞光度术检测其在mRNA和蛋白水平的表达.结果101只F0代仔鼠中,10只F0代仔鼠基因组中有HLA-B2704基因整合.其中昆明鼠×昆明鼠F0代3只,整合率为4.7%,C57BL/6×昆明鼠F0代7只,整合率为18.9%(x2检验,P＜0.05).阳性小鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有HLA-B2704基因的mRNA水平表达,其外周血淋巴细胞膜上HLA-B2704基因的蛋白表达为7.87%(直方图统计表,5%以上为阳性).结论尽管受精卵的注射成活率差异无统计学意义,在注射浓度相同的情况下,含有C57BL/6基因背景的受精卵更易整合外源基因,而单纯昆明鼠的受精卯不易接受外源基因.C57BL/6×昆明鼠F0代比单纯昆明鼠F0代更适合于转基因动物的制备.HLA-B2704的重链分子与小鼠β2微球蛋白结合的复合物不稳定,不易于在细胞表面表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕厚山	北京大学关节病诊疗研究中心	172	3273	30.0	48.0
2	王东	北京大学关节病诊疗研究中心	188	702	14.0	20.0
3	陈占昆	北京大学关节病诊疗研究中心	18	112	6.0	9.0
4	蒋东芳	北京大学关节病诊疗研究中心	10	41	5.0	5.0
5	丁海明	北京大学关节病诊疗研究中心	5	17	3.0	4.0