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目的:探讨脱氧核酶对端粒酶蛋白亚基hTERT mRNA的切割作用及对人鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:针对hTERT基因的核苷酸序列,合成"10~23"型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTERTmRNA;转染鼻咽癌细胞后,用RT-PCR扩增hTERT基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达.结果:未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3'末段添加例位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTERT mRNA;在转染鼻咽癌细胞后,DzTi比DzT对hTERT mRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低鼻咽癌细胞端粒酶活性(P<0.01)、抑制鼻咽癌细胞的生长(P<0.05)和bcl-2基因的表达(P<0.05).上调bax基因的表达(P<0.05).DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'在体外和胞内均不表现对hTERT mRNA的切割作用.结论:人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTERT mRNA,并降低鼻咽癌细胞的端粒酶活性,促进鼻咽癌细胞凋亡.作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中将具有极其重要的应用价值.
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文献信息
篇名 脱氧核酶对端粒酶hTERT mRNA的切割以及对鼻咽癌细胞凋亡相关基因的影响
来源期刊 广东医科大学学报 学科
关键词 脱氧核酶 端粒酶 鼻咽肿瘤 细胞凋亡
年,卷(期) 2005,(3) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 242-245
页数 4页 分类号 R739.6|Q523
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-4057.2005.03.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张毅 广东医学院附属医院中心实验室 28 214 7.0 14.0
2 杨展 广东医学院附属医院中心实验室 33 185 8.0 11.0
3 李明意 广东医学院附属医院肝胆外科 42 140 6.0 8.0
4 赵家明 广东医学院附属医院中心实验室 24 86 6.0 7.0
5 李震 广东医学院附属医院中心实验室 12 48 4.0 6.0
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脱氧核酶
端粒酶
鼻咽肿瘤
细胞凋亡
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广东医科大学学报
双月刊
2096-3610
44-1731/R
大16开
广东湛江文明东路2号
1983-01-01
中文
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22989
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