人视网膜微血管周细胞原代培养及鉴定

• 作者: 刘军 刘洪雷 惠延年 王雨生
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 周细胞 细胞培养 肌动蛋白 α-平滑肌肌动蛋白 3G5 免疫组化 增生
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: R774
• 字数: 3404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2005.01.008

摘要

目的:建立人视网膜微血管周细胞的培养方法并研究体外其免疫组化特征.方法:由人微血管片断生长出的周细胞首先通过其形态及生长方式进行鉴别,采用含有200mL/L胎牛血清的DMEM培养基于未包被培养瓶培养;非周细胞例如色素上皮细胞可机械除杂;周细胞特征性的标志物通过免疫组化和激光共聚焦显微镜评价.人视网膜微血管周细胞的生长曲线通过MTT法测定.结果:在这样的培养条件下,周细胞1～2d由微血管片断游出,1wk可形成较大克隆,大约2wk可融合成单层细胞.这些细胞为高度不规则形,重叠生长方式,没有接触抑制;表达α-平滑肌肌动蛋白,肌动蛋白以及3G5阳性;不含有von Willebrand因子和角蛋白;周细胞可部分混杂其他细胞,纯度为99%;周细胞可持续生长并传代.结论:本研究为首次报道人源性视网膜微血管周细胞的培养及鉴定.本培养实验为研究人眼异常血管疾病提供了新的平台.