PD-L1蛋白的表达、纯化与鉴定

• 作者: 倪兵 吴玉章 姜曼 毛丽伟 肖宇 黎万玲
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PD-L1 RT-PCR 克隆
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 402-405
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q513.2
• 字数: 3923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.05.009

摘要

目的克隆人PD-L1的基因,纯化Flp-In CHO系统表达PD-L1蛋白.方法用RT-PCR方法制备PD-L1基因,以哺乳细胞高效表达质粒载体pSec/WG为载体构建重组PD-L1/pSec/WG质粒,重组体用载体上的通用引物为测序引物,鉴定克隆的正确性.再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化转染Flp-In CHO细胞收集上清,G蛋白亲和层析法纯化蛋白.用免疫印迹法鉴定转化细胞所分泌上清的PD-L1基因的表达.结果正确构建了PD-L1/pSec/WG重组质粒,并且在转化细胞所分泌的上清中检测出了PD-L1基因的表达.亲和层析法成功纯化出PD-L1蛋白,分子量为40×10 3.结论成功地构建了PD-L1/pSec/WG重组质粒,纯化出PD-L1蛋白,可进行下一步mAb制备,进一步研究其功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴玉章	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	325	1583	17.0	22.0
2	姜曼	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	48	115	6.0	8.0
3	倪兵	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	71	225	8.0	11.0
4	黎万玲	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	35	92	6.0	7.0
5	肖宇	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	6	10	2.0	3.0
6	毛丽伟	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	8	9	2.0	2.0