噬菌体抗体库技术制备胃癌单抗MGd1的抗独特型抗体

• 作者: 何凤田 吉清 李蓉芬 胡颖 郑英如 高会广 龚薇
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 单克隆抗体 抗独特型抗体 噬菌体 抗体库
• 年，卷（期）: 2005,（19）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1911-1914
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33|R392.7|R735.2
• 字数: 2867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.19.001

摘要

目的获得胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型抗独特型抗体(抗-Id),为研制针对MGd1的抗-Id重组胃癌瘤苗创造条件.方法分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VL DNA,进而连接形成ScFv DNA.将ScFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库.以MGd1对文库进行4轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定.结果VH、VL和ScFv DNA分别约为340、320和750 bp.抗体ScFv文库经4轮筛选后,在随机筛检的40个克隆中得到17个呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆.在17个克隆中,有3个呈现β或γ型抗-Id ScFv.结论应用噬菌体抗体库技术成功制备了针对单抗MGd1的抗-Id ScFv,从而为筛选新的胃癌重组抗-Id瘤苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何凤田	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	127	592	12.0	15.0
2	李蓉芬	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	38	166	7.0	11.0
3	郑英如	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	67	410	12.0	17.0
4	高会广	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	15	84	4.0	9.0
5	吉清	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	9	28	3.0	5.0
6	龚薇	第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室	19	67	5.0	7.0