逆转录病毒介导外源基因高效感染大鼠骨髓间充质干细胞

• 作者: 何慧华 刘金保 周萍 彭燕 梁仲培 董伟华 董晓先 郑晴雯
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源盒基因 逆转录病毒载体 基因转移 骨髓间充质干细胞 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3424-3427,3431
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3052字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.22.018

摘要

目的通过逆转录病毒系统将小鼠同源盒基因Sox1转移至大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC),检测外源基因的表达,感染效率及感染时间.方法常规分子生物学亚克隆技术构建重组逆转录病毒载体,转染至包装细胞株PT67,制备含目的基因的重组逆转录病毒液,感染rMSC,并用带EGFP表达盒的pLEGFP-N1载体的逆转录病毒系统作为平行对照,评估感染率;使用Western blot以及免疫组织化学的方法检测携带目的基因的重组逆转录病毒在rMSC中的感染和表达情况.结果本实验成功地制备了pLXSN-Sox1重组逆转录病毒载体并制备出高滴度病毒颗粒;将病毒上清感染rMSC,EGFP阳性细胞为21%,感染时间持续20d,而对照脂质体转染法EGFP阳性细胞仅为3%.免疫组化及Western blot显示用重组逆转录病毒液感染的rMSC可表达外源基因产物Sox1蛋白.结论采用逆转录病毒介导的方法可以将外源性基因高效转移至rMSC中,并有外源性基因的稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董伟华	广州医学院病理生理学教研室	42	410	8.0	19.0
2	彭燕	广州医学院病理生理学教研室	16	50	4.0	6.0
3	何慧华	广州医学院病理生理学教研室	16	268	7.0	16.0
4	董晓先	广州医学院病理生理学教研室	32	402	10.0	19.0
5	梁仲培	广州医学院病理生理学教研室	17	250	7.0	15.0
6	周萍	广州医学院病理生理学教研室	7	25	3.0	4.0
7	郑晴雯	广州医学院病理生理学教研室	3	2	1.0	1.0