逆转录病毒介导hBMP7基因转染兔骨髓间充质干细胞的表达

• 作者: 曾位森 王珂 胡罢生 裴国献 金丹 陈滨 魏宽海
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白质类 生物医学工程
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 477-479
• 页数: 4页
• 分类号: R318.08
• 字数: 2593字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2002.06.003

摘要

采用粘-粘端连接方法构建hBMP7逆转录病毒载体,重组质粒转染包装细胞PT67后,制备含目的基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞.限制性内切酶酶切分析筛选插入方向正确的重组质粒并进行基因测序.结果显示,hBMP7逆转录病毒载体中外源基因插入方向正确、无碱基错误和缺失.原位杂交和免疫组织化学检测表明,感染后2天经基因转染的BMSc原位杂交和免疫组化检测结果呈阳性,未经转染的细胞检测结果呈阴性.转染的BMSc经G418筛选至4周仍有外源BMP蛋白的表达.提示采用逆转录病毒介导方法转染的BMSc中可有外源性BMP7 mRNA和蛋白的表达.