小鼠LRP16基因打靶载体的构建和胚胎干细胞同源重组克隆鉴定

• 作者: Masatoshi Nomura 伍志强 司艺玲 孟元光 母义明 赵亚力 韩为东
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: LRP16 基因打靶 ES细胞
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 167-171
• 页数: 5页
• 分类号: R349.6
• 字数: 3692字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2006.03.002

摘要

目的 既往研究表明LRP16基因是一个雌激素反应基因,其表达水平与乳腺癌细胞增殖及侵袭密切相关.为对该基因进行生理功能研究,本文构建了针对小鼠LRP16基因的打靶载体,转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES cells)并筛选同源重组克隆.方法 PCR方法筛选129品系小鼠基因组文库中LRP16克隆,在第5外显子内插入SA-RIES-βgeo序列,构建插入失活型打靶载体并转染ES细胞,经G418筛选,挑取抗性克隆,Southern blot方法鉴定同源重组ES细胞克隆.结果 将包含第5至11外显子的LRP16基因组片段亚克隆到pBluescript SKⅡ+载体,SA-IRES-βgeo序列的正确插入第五外显子中,打靶载体成功转染ES细胞,Southern blot结果显示具有一个打靶序列同源重组型插入的ES细胞克隆.结论 成功构建了第五外显子插入失活型LRP16基因打靶载体并筛选到同源重组型ES细胞,为下一步建立LRP16缺失型小鼠并为从整体水平研究LRP16基因的生理功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亚力		93	443	10.0	17.0
2	孟元光		133	638	12.0	19.0
3	母义明		329	2074	22.0	31.0
4	韩为东		113	744	13.0	23.0
5	伍志强		47	114	6.0	9.0
6	司艺玲		37	134	7.0	9.0
7	Masatoshi Nomura	日本九州大学医学院第三内科	1	5	1.0	1.0