IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究

• 作者: 刘崇怀 古勤生 张亚冰 曹香林 陈建军
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 卷叶病毒Ⅲ 检测 IC-RT-PCR
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 109-112
• 页数: 4页
• 分类号: S436.631.+9
• 字数: 3429字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2006.08.035

摘要

结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测.从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段.为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coli JM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒.由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠.最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张亚冰	河南科技大学农学院	41	446	11.0	20.0
2	古勤生	中国农业科学院郑州果树研究所	60	585	14.0	22.0
3	刘崇怀	中国农业科学院郑州果树研究所	177	1714	22.0	35.0
4	陈建军	河南师范大学生命科学学院	42	287	10.0	14.0
5	曹香林	河南师范大学生命科学学院	26	311	8.0	17.0