腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌细胞HepG2的研究

• 作者: 吴在德 易继林 曾建平 王从俊 王炜煜 薛新波 许荣华 郑建伟 陈堃
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤,实验性/治疗 基因疗法 肝癌细胞HepG2 基因MDA-7/IL-24
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 849-854
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7|R730.261
• 字数: 4369字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6947.2006.11.013

摘要

目的 观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期.结果 复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达;MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期,能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用.结论 复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达,促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡,选择性地杀伤肝癌细胞HepG2,而对正常肝细胞L02无任何毒性作用.