禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用

• 作者: 乔彩霞 刘继红 吴丹 张鹤晓 蒲静 谷强 郭晋优 高志强
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: AIV 核蛋白 琼脂免疫扩散试验
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: S85
• 字数: 3788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2006.07.017

摘要

采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达.所表达的蛋白经Ni+亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性.利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法.所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%.实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒲静	北京出入境检验检疫局动检中心	34	111	6.0	8.0
2	高志强	北京出入境检验检疫局动检中心	48	143	7.0	9.0
3	张鹤晓	北京出入境检验检疫局动检中心	43	280	9.0	15.0
4	乔彩霞	北京出入境检验检疫局动检中心	27	128	7.0	9.0
5	吴丹	北京出入境检验检疫局动检中心	14	119	6.0	10.0
6	谷强	北京出入境检验检疫局动检中心	31	138	6.0	11.0
7	刘继红	北京出入境检验检疫局动检中心	10	104	4.0	10.0
8	郭晋优	北京出入境检验检疫局动检中心	4	78	3.0	4.0