重组人β干扰素在DHFR--CHO细胞中的高效表达

• 作者: 史艳秋 宋静 王鹏 邹思湘 陈畅 顾黎
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 中国仓鼠卵巢细胞 β干扰素 真核表达 抗增殖活性
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 129-133
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|R512.6+2
• 字数: 3443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1678.2006.03.001

摘要

目的 由二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢(DHFR--CHO)细胞高效表达重组人β干扰素(rhIFN-β),比较来源于E.coli、Yeast和CHO细胞的IFN-β抗增殖活性.方法 采用PCR技术,从pLG104R载体中扩增目的 基因,经XhoⅠ和SmaⅠ双酶切后克隆到真核表达载体pCI-dhfr中,采用阳离子脂质体介导方法,将构建的表达载体转染到CHO细胞中.通过MTX的加压筛选,以病毒诱导的细胞病变抑制(CPEI)法进行活性定量检测,获得稳定、高效表达rhIFN-β的CHO细胞株,并扩大培养.分离纯化后,定量并鉴定表达产物.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法比较E.coli、Yeast和CHO细胞表达体系所生产的rhIFN-β的抗增殖活性.结果 得到由CHO细胞株表达的rhIFN-β纯品,且抗增殖活性显著高于其他2个表达体系.结论 CHO细胞可大规模生产rhIFN-β,且活性高于其他表达体系,显示了以CHO细胞为生产平台的优越性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹思湘	南京农业大学动物医学院	133	1407	20.0	27.0
2	宋静	山东大学微生物技术国家重点实验室	52	203	8.0	10.0
3	陈畅	山东大学微生物技术国家重点实验室	25	311	10.0	16.0
4	史艳秋	南京农业大学动物医学院	16	143	7.0	11.0
6	顾黎	山东大学微生物技术国家重点实验室	16	183	7.0	13.0
7	王鹏	山东大学微生物技术国家重点实验室	112	777	14.0	24.0