分离大鼠原代肝细胞的改进方法

• 作者: 孟志云 朱晓霞 窦桂芳 顾若兰
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞分离 肝细胞 胶原酶类 代谢
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 365-368
• 页数: 4页
• 分类号: Q24
• 字数: 3099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.04.018

摘要

目的:建立一种简便、经济、高效分离原代大鼠肝细胞的方法,适用于体外药物代谢研究.方法:改进方法采用低浓度胶原酶"软消化"方式,并增加预孵育过程.比较传统分离方法和改进方法在细胞产量、活率以及胶原酶用量上的差异,并将改进方法所得细胞分别与CYP2C、CYP2E、CYP3A典型底物及新药17-AAG共孵育,检测CYP450酶活性及其实际应用价值.结果:改进方法分离的肝细胞在细胞产量尤其是活率上明显高于传统方法,胶原酶用量大大降低,典型底物甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睾酮经细胞代谢检测到典型羟基化代谢产物,17-AAG经孵育后与体内样品检测结果一致.结论:改进方法可明显提高细胞产量和活率,所得肝细胞具备良好的CYP450酶活性,适用于体外代谢研究,预测药物体内过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	窦桂芳	军事医学科学院野战输血研究所	52	377	9.0	17.0
2	朱晓霞	军事医学科学院野战输血研究所	21	60	4.0	6.0
3	孟志云	军事医学科学院野战输血研究所	38	172	7.0	11.0
4	顾若兰	军事医学科学院野战输血研究所	8	12	2.0	3.0