重组大鼠溶菌酶N端多肽的原核表达及其对晚期糖基化终产物的结合作用

• 作者: 刘誉 周羽竝 周翔 莫宏波
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 溶菌酶 原核表达 重组多肽 晚期糖基化终产物(AGEs)
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 784-790
• 页数: 7页
• 分类号: R730.631
• 字数: 4461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2006.06.004

摘要

目的:探讨溶菌酶N端多肽片段基因的重组并在原核中表达,研究该片段与晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的结合作用.方法:从SD大鼠外周血白细胞中抽提总RNA,经逆转录并扩增大鼠溶菌酶N端基因片段,以质粒pET-30a(+)为载体构建表达质粒pLY77.含pLY77的工程菌Rosetta(DE3)经IPTG诱导,对该重组多肽进行高效表达.表达产物经Ni+-NTA琼脂糖柱层析纯化后,得到的溶菌酶N端多肽片段LY77经SDS-PAGE和Western印迹法鉴定,ELISA法分析体外结合活性.结果:LY77在Rosetta(DE3)中高效表达,主要以可溶性蛋白的形式存在,相对分子质量约为11 000;LY77对体外制备的晚期糖基化蛋白BSA-AGEs具有显著的结合活性.结论:LY77对AGEs具有很高的亲和力,为进一步探讨LY77可能应用于体内促进AGEs的清除和参与免疫调节作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周羽竝	暨南大学医学院生物化学教研室	45	195	7.0	11.0
2	刘誉	暨南大学医学院生物化学教研室	28	104	6.0	9.0
3	莫宏波	暨南大学医学院生物化学教研室	12	76	4.0	8.0
4	周翔	暨南大学医学院生物化学教研室	2	3	1.0	1.0