粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定

• 作者: 任大明 张伯生 黄路标
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳酸菌 粪肠球菌 启动子 克隆载体 GFP
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 页码范围: 288-292
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 4257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0427-7104.2006.03.003

摘要

PCR扩增来自质粒pUC119的β-内酰胺酶基因(bla)作报告基因,克隆进质粒pNZ8037上的能被Nisin诱导的启动子PnisA下游,构建了粪肠球菌启动功能片段探测载体pNZ-bla.利用该探测载体从粪肠球菌染色体总DNA中克隆到了能在粪肠球菌中表达的一系列具有启动功能的DNA片段,将包含克隆片段的pNZ-P-bla6质粒电击转化粪肠球菌,培养转化子并检测其抗氨苄强度,结果表明其抗氨苄强度大于Nisin诱导的含pNZ-bla质粒的粪肠球菌.表明克隆的功能片段启动能力强于PnisA.在pNZ-P-bla6的启动功能片段下游Sau3AⅠ和EcoRⅠ之间接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建表达绿色荧光蛋白的质粒载体pNZ-P-gfp并导入粪肠球菌中,共聚焦显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄路标		2	8	1.0	2.0
2	张伯生		4	27	3.0	4.0
3	任大明		3	19	2.0	3.0