非洲绿猴层黏连蛋白受体的克隆、表达及纯化

• 作者: 党颖 张清华 朱旭东 李少林 李涛 许龙 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 非洲绿猴 层黏连蛋白受体 基因克隆 蛋白表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 500-502
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.005

摘要

目的:克隆、表达非洲绿猴层黏连蛋白受体(LR),对该受体蛋白进行纯化、复性研究.方法:采用RT-PCR从Vero-E6细胞总RNA中扩增非洲绿猴LR的cDNA序列,克隆到pGEM-T Easy载体上;将LR编码区插入到表达载体pET22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3);用IPTG进行诱导表达;用镍亲和柱进行亲和纯化;采用分部透析方法进行复性.结果:非洲绿猴LR基因序列与人LR的基因编码序列有16个碱基差异,但蛋白序列只有1个氨基酸的改变.LR蛋白以包涵体形式表达.采用分部透析方法可使部分蛋白得到复性.结论:克隆了首个非洲绿猴的相对分子质量为37 000的LR的基因,与人LR基因序列有16个碱基差异,但其中15处都为同义突变,所以二者的蛋白质序列只有1个氨基酸改变,即293位D→E,提示LR在进化中具有很大的保守性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李少林		232	1134	14.0	22.0
2	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
3	朱旭东	军事医学科学院生物工程研究所	28	118	6.0	9.0
4	党颖	军事医学科学院生物工程研究所	9	45	4.0	6.0
5	李涛	军事医学科学院生物工程研究所	16	28	4.0	5.0
6	许龙	军事医学科学院生物工程研究所	10	32	3.0	5.0
7	张清华	军事医学科学院生物工程研究所	7	12	2.0	3.0