外源性PTEN基因转染对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响

• 作者: 王春友 蒋春舫 陈剑英 陈庆永
• 来源期刊: 华中科技大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌 PTEN基因 基因转染 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 358-361
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2006.03.022

摘要

目的研究外源性PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响.方法应用基因重组技术构建并鉴定pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,重组质粒被BglⅡ酶切线性化后运用脂质体介导基因转染法,将外源性PTEN基因导入乳腺癌细胞系MDA-MB-468中,经G418筛选阳性克隆,空载体pcDNA3.1(-)转染入细胞作为对照,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分析目的基因及蛋白表达,膜联蛋白Ⅴ-FITC(FITC-Annexin Ⅴ)和碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果重组真核表达质粒pcDNA3.1-PTEN经限制性内切酶Xba Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,电泳后显示约1.4kb的PTEN目的片段和5.4kb的pcDNA3.1(-)载体片段,证明重组质粒连接正确.RT-PCR、Western blot均显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTEN mRNA及其蛋白表达,流式细胞分析显示恢复PTEN蛋白表达后其凋亡率较其它两组细胞凋亡率增高(均P＜0.01).结论成功地构建了pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,外源性PTEN基因可通过诱导细胞凋亡而抑制乳腺癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春友	华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科	244	1645	18.0	28.0
2	陈剑英	华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科	25	60	4.0	6.0
3	陈庆永	华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊外科	21	84	6.0	8.0
4	蒋春舫	华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊外科	20	84	6.0	8.0