多效生长因子基因沉默抑制PTEN基因敲除细胞的增殖

• 作者: 何欣蓉 刘敏丽 吴德昌 李刚 米粲 胡迎春 霍艳英 项晓琼
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 多效生长因子 PTEN 小干扰RNA 基因沉默 基因,肿瘤抑制 基因表达 转染
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 113-115,121
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.02.004

摘要

目的:在肿瘤抑制基因PTEN缺失的小鼠胚胎成纤维细胞Pten-/-MEF241细胞中,研究多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)对细胞增殖的影响.方法:设计并合成可编码针对小鼠Ptn基因的小干扰RNA (siRNA)寡核苷酸,构建至pSilencerTM3.1-H1载体,将载体转染进Pten-/-MEF241细胞中,获得稳定表达细胞克隆株,通过Northern印迹检测Ptn基因表达被抑制的情况,根据细胞生长曲线检测沉默Ptn基因对Pten-/-MEF241细胞生长的影响.结果:获得的稳定克隆株中,与对照细胞相比,Ptn基因的表达在转染Ptn siRNA-B的3株细胞中均得到了有效的抑制,而在转染Ptn siRNA-C的2株细胞中抑制效果较差.生长曲线结果显示,在Pten-/-MEF241细胞中,沉默Ptn基因能够减缓Pten-/-MEF241细胞的生长速度.结论:本研究获得了可有效抑制Ptn基因的小干扰RNA,证明沉默Ptn基因可抑制PTEN 基因缺失细胞的增殖,提示Ptn可作为治疗具有PTEN基因突变的肿瘤的药物靶标.