短干扰RNA特异性抑制哺乳动物β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达

• 作者: 冯改丰 刘朝晖 刘苏虎 杨广笑 王全颖 胡海涛 董炜疆
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病/治疗 RNA,小分子干扰 淀粉样β蛋白前体 基因 短干扰RNA β分泌酶
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 622-629
• 页数: 8页
• 分类号: R329|R749.16
• 字数: 5840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.06.009

摘要

目的:探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(p-site APP cleaving enzyme,BACE)的短干扰RNA(shorr interfering RNAs,siRNA)是否能抑制BACE在哺乳动物细胞中的表达,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段.方法:采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响.结果:成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达.结论:成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供了重要的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡海涛	西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系	93	590	12.0	18.0
2	董炜疆	西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系	36	208	9.0	13.0
3	王全颖		62	151	5.0	8.0
4	冯改丰	西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系	34	230	9.0	14.0
5	杨广笑		67	148	5.0	7.0
6	刘苏虎	西安交通大学第二医院血液科	17	121	6.0	10.0
7	刘朝晖	西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系	20	68	4.0	7.0