6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建

• 作者: 侯一平 刘莉 吴谨 廖淼 张林 张霁 戴浩霖 李英碧 陈国弟
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医物证学 荧光分析 内标 矩阵值
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-277,彩插Ⅱ
• 页数: 5页
• 分类号: D9
• 字数: 3203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5728.2006.05.007

摘要

目的 为在310基因分析仪上进行6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件.方法 以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500～80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的Matrix标准物,用4种Matrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的Matrix文件.结果 扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰.混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系.结论 建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析Matrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础.