微流控芯片电泳-多重聚合酶链反应法同时测定多个单碱基多态性位点

• 作者: 倪坤仪 周国华 汪维鹏
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 微流控芯片电泳 多重聚合酶链反应 脱氧核糖核酸适配器 单碱基多态性 药物代谢酶
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1389-1394
• 页数: 6页
• 分类号: O6
• 字数: 4200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2006.10.007

摘要

以微流控芯片电泳为检测平台,建立了多重PCR扩增法同时测定多个单碱基多态性(SNP)位点的方法.先通过PCR扩增得一段含所有待测SNP位点的长片段;用限制性内切酶消化成短片段,再将酶切反应产物与脱氧核糖核酸适配器(DNA adapter)相连;以连接产物为模板,分成两管,分别用n条等位基因特异性引物和一条通用引物进行n重PCR扩增;最后用微流控芯片电泳法分离PCR扩增产物,根据两管扩增产物的芯片电泳图谱中扩增片段的大小判断SNP的类型.以细胞色素P450 2D6(CYP2D6)基因中的5个SNP位点(100C＞T、1661G＞C、1758G＞T、2470T＞C和2850C＞T)为检测对象,考察了各等位基因特异性引物之间的相互影响和扩增反应的特异性,采用微流控芯片电泳法成功测定了20名健康中国人的CYP2D6基因中5个SNP位点的基因多态性,与聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)测定结果完全一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪坤仪	中国药科大学分析化学教研室	51	664	14.0	24.0
2	周国华	中国药科大学分析化学教研室	42	681	10.0	25.0
6	汪维鹏	中国药科大学分析化学教研室	6	220	4.0	6.0