两种抑制MHCⅡ类分子表达方法的比较

• 作者: 周光炎 林琪 林琳 欧启水 陆佩华 黄立东
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CⅡTA SLA 突变体 反义RNA
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 75-77,81
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 2656字
• 语种: 中文

摘要

目的:评价CⅡTA(MHC class Ⅱ transactivator, CⅡTA)基因突变体和反义RNA对MHCⅡ类分子的抑制效率和胞内稳定性,为改造MHC分子奠定基础.方法:用PCR、酶切及连接技术,构建不含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA2,含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA3突变体及CⅡTA基因的反义RNA-pcDNA3/CⅡTA反.用脂质体转染法,将突变体、反义RNA及空载体pcDNA3转入PIEC细胞和L23细胞中.持续四个月,流式细胞术观察它们对PIEC/L23细胞株MHCⅡ类(SLA-DR)分子的诱导性和组成性表达的影响.结果:转染pcDNA3、pcDNA3mCⅡTA2后,PIEC/L23细胞SLA-DR的表达没有受到抑制,转染pcDNA3mCⅡTA3后,9/20(45.0%)的PIEC细胞、10/20(50.0%)的L23细胞SLA-DR的表达受到明显抑制,抑制率高达90%以上;转染pcDNA3mCⅡTA反后,7/15(46.7%)PIEC细胞、5/15(33.3%)L23细胞SLA-DR的表达受到明显抑制,抑制率高达85%以上.持续检测4个月,转染pcDNA3mCⅡTA3的PIEC/L23细胞SLA-DR的表达受抑率均在90%以上.转染反义RNA的PIEC/L23细胞在第65/45天,SLA-DR表达抑制率降至10%以下.结论:构建成功的CⅡTA突变体和反义RNA均能有效抑制SLA-DR表达,但CⅡTA突变体稳定存在于胞内的时间长,构建突变体是利用CⅡTA抑制MHCⅡ类分子的好方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周光炎	上海第二医科大学免疫学研究所	58	348	11.0	14.0
2	林琳	上海第二医科大学免疫学研究所	12	26	3.0	4.0
3	黄立东	上海第二医科大学免疫学研究所	11	28	3.0	4.0
4	陆佩华	上海第二医科大学免疫学研究所	43	308	9.0	15.0