腺病毒介导CⅡTA突变体基因转移抑制MHCⅡ类分子表达的体外研究

• 作者: 张军 沈茜 管政
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CⅡTA 突变体 MHCⅡ类分子 腺病毒
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 872-877,882
• 页数: 7页
• 分类号: R392
• 字数: 6430字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建携带小鼠MHCⅡ类分子反式激活因子(MHC class Ⅱ molecule transactivator,CⅡTA)突变体基因的腺病毒,并观察腺病毒介导该基因的表达情况以及表达产物的体外功能.方法:采用常规分子生物学方法从IFN-γ诱导后的BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中获得Ⅳ型CIITAcDNA;利用重叠延伸PCR法构建CIITA突变体基因,并克隆入表达载体pIRES;采用pAdEasy-1系统获得具有感染能力的、携带CIITA突变体基因的缺陷型重组腺病毒(Ad-CIITAm)和空载对照病毒(Ad-GFP),并经大量扩增、纯化及滴度测定;将Ad-CⅡTAm和Ad-GFP分别感染HeLa细胞和Raji细胞,流式细胞术观察对诱导型和组成型HLA-DR分子表达的影响.结果:成功克隆了小鼠CⅡTA突变体基因,并构建了携带小鼠CⅡTA突变体基因的重组腺病毒Ad-CⅡTAm;经流式细胞术证实感染Ad-CⅡTAm的Hela和Raji细胞较感染Ad-GFP的细胞,其表面HLA-DR分子的表达均受到明显的抑制.结论:本实验证实了重组腺病毒介导表达的小鼠CⅡTA突变体在体外能够有效地抑制MHCⅡ类分子的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈茜	第二军医大学长海医院实验诊断科	184	1189	17.0	25.0
2	张军	第二军医大学长海医院实验诊断科	89	490	11.0	17.0
3	管政	第二军医大学长海医院实验诊断科	5	8	2.0	2.0