新型抗体偶联胶原包被质粒DNA血管支架的研制

• 作者: 冷希岗 刘兰霞 宋存先 张超 王海 谷海刚 金旭
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 基因治疗 载体 抗体 支架 质粒 胶原
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 665-669,插2
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 语种: 中文

摘要

目的 研制一种以支架为基础的高效、局部定位的新型基因投递体系.方法 利用双官能偶联剂N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯(SPDP)将支架表面涂布的胶原与抗DNA抗体化学键合,该抗体再与质粒DNA(pEGFP-C1)免疫结合,并加入阳离子脂质体提高细胞转染效率.用125I标记抗DNA抗体,检测支架表面偶联的抗体量.用32P标记pEGFP-C1检测通过上述方法结合在支架上的DNA量,同时以物理吸附组作为对照,通过细胞培养和兔体内实验验证其效果.结果 实验组胶原基质携带抗体量约为对照组的15倍(P＜0.005).实验组胶原基质携带质粒DNA量显著高于对照组(P＜0.01),释放时间达13 d以上.细胞转染实验结果表明,抗DNA抗体连结pEGFP-C1质粒组支架胶原涂层表面有较多GFP转染阳性细胞生长,而未与支架接触的周边细胞几乎无转染.动物实验结果显示约有(2.8±0.7)%血管壁细胞被转染,新生内膜转染率最高,达7%,远隔器官未见载体扩散.结论 抗体偶联胶原包被质粒DNA血管支架是一种新型高效、局部定位的基因转染体系.该体系适用于多种基因转染,且基因释放在一定条件下可控,为开发心血管内靶向基因投递体系提供了新思路.