青花菜雄性不育相关基因BoDHAR的克隆与表达分析

• 作者: 康俊根 张国裕 张延国 王晓武 程智慧
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 青花菜(Brassica oleracea L.var.italica) DHAR(dehydroascorbate reductase) 基因克隆 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 751-756
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.05.010

摘要

以一个与甘蓝显性核不育相关的差异表达片段的序列为信息探针,通过在NCBI与TAIR网站数据库中进行同源EST序列搜索,经人工拼接、RT-PCR、PCR克隆与序列分析,获得了青花菜脱氢抗坏血酸还原酶DHAR dehydroascorbate reductase基因的cDNA与DNA全长序列,命名为BoDHAR.并利用双链接头介导PCR的染色体步行技术(genome walking)克隆了其上游644bp的5'端序列.所获的BoDHAR基因全长1486bp,存在两个内含子,DNA编码区序列633bp,编码210个氨基酸;序列分析表明:BoDHAR与同源基因AT1G19570.1 cDNA序列有82.3%的一致性,推导的氨基酸序列有79.6%的一致性;编码的水溶性蛋白存在多个磷酸化位点;5'端上游区存在明显的转录调控序列.半定量RT-PCR结果表明:BoDHAR在可育系花蕾中的表达量明显高于不育系花蕾,在花药中的表达明显高于其它部位.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程智慧	西北农林科技大学园艺学院	274	4372	33.0	51.0
2	王晓武	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	100	1954	26.0	39.0
3	张国裕	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	12	197	9.0	12.0
7	康俊根	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	4	72	4.0	4.0
8	张延国	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	17	297	11.0	17.0