SIV p27单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 丛喆 于浩 佟巍 孙敏 涂新明 秦川 蒋虹 赖春晖 陈颂 魏强
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SIV 蛋白质p27 杂交瘤 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 29-33
• 页数: 6页
• 分类号: R373-33
• 字数: 3729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2006.01.009

摘要

目的建立SIV p27杂交瘤细胞株,并对其分泌的SIV p27单克隆抗体进行初步鉴定.方法使用基因重组的SIV p27蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体.通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定;采用Western blot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类,对单克隆抗体进行鉴定.结果获得4株可稳定分泌SIV p27单克隆抗体的杂交瘤细胞,1C3、2B6为IgG1类,2E12为IgG2b类,3G3为IgG2a类.4株单抗均能识别SIV的p27蛋白,与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应,2B6、2E12与HIV p24有交叉反应.免疫荧光法检测腹水效价为1:10240～1:40960.1C3、2B6、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101.2E12与3G3识别不同的抗原表位.结论成功地制备出4株SIV p27单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法,进行SIV/SAIDS及其艾滋病相关研究,奠定了基础.