斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟血清抗体最佳条件的研究

• 作者: 文心田 曹三杰 洪云平
• 来源期刊: 畜禽业：南方养猪
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟 抗体Dot—PPA—ELISA 最佳条件
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: S858.283

摘要

以硝酸纤维膜为固相载体，以猪瘟病毒为抗原，确定了Dot—PPA—ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明，猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化，以0．05mol／LpH9．5CBS缓冲液稀释至浓度为0．98～1．15mg／mL制备诊检抗原膜片；采用4％蛋清蛋白0．05mol／LpH9．5CBS封闭；检测反应稀释液应用0．01 M PPBST（含0.1％PEG、0．05Tween-20），酶结合物工作浓度以1：30，底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强.