低氧诱导因子-1α基因体外转染内皮祖细胞的可行性及对其成内皮细胞活性的影响

• 作者: 何奔 刘嬿 姜萌 王长谦 聂晓绚 范华骅 邵琴 高跞
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 低氧诱导因子 单个核细胞 CD34+单个核细胞 内皮祖细胞 基因转染 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 737-740,封三
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2006.10.016

摘要

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因体外转染入内皮祖细胞(EPCs)的可行性及对其表现型的影响.方法 构建真核表达载体pEGFP-HIF-1α.分离外周血单个核细胞(PBMC)及脐血CD34+单个核细胞(MNC CD34+).采用电穿孔基因转染,荧光显微镜检测转染效率,逆转录聚合酶链反应检测HIF-1α的表达.培养1周后,分为4组:A组:只加入血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导培养;B组:转染入空质粒pEGFP-C1,并加入VEGF、bFGF;C组:转染入pEGFP-HIF-1α质粒;D组:未加VEGF、bFGF诱导.采用流式细胞仪检测CD31阳性细胞百分率.结果 构建的pEGFP-HIF质粒基因序列与基因库(U22431,gi:881345)HIF-1α的CDS编码区完全一致.PBMC转染效率达38%,MNC CD34+转染效率达到42%.PBMC培养1周时,A、B、C组间CD31阳性率的差异无显著性(P值均＞0.05),但均显著高于D组(P值均＜0.05).MNC CD34+培养1周后,A、B、C组间CD31阳性率的差异无显著性(P值均＞0.05).结论 真核表达载体pEGFP-HIF体外电穿孔转染入PBMC,提示转染HIF-1α能促祖细胞向内皮细胞分化,效果与加入细胞因子诱导相似,其能增加祖细胞增殖活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范华骅	上海血液中心血液工程研究室	10	71	5.0	8.0
2	高跞	上海血液中心血液工程研究室	5	18	3.0	4.0
3	聂晓绚	上海血液中心血液工程研究室	7	48	3.0	6.0
4	刘嬿	上海血液中心血液工程研究室	4	7	2.0	2.0