利用碱性磷酸酶融合表达技术研究神经导向因子netrin-4的功能

• 作者: 周仁平 张成岗 王利红 秦树桐 高艳
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 神经导向因子 netrin-4 碱性磷酸酶 融合表达 基因 神经元
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 209-212,252
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4357字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.03.003

摘要

目的:采用碱性磷酸酶(AP4)标记技术研究netrin-4的神经导向功能和受体结合特征,并评估碱性磷酸酶作为标签分子在真核基因功能研究中的意义.方法:将netrin-4全长及3个结构域编码区cDNA克隆到碱性磷酸酶表达载体APtag4,成功构建真核表达载体AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT,进而在COS7细胞中表达出含有AP标签的融合蛋白,并通过神经组织块培养技术和神经元原代培养技术对其活性进行鉴定.结果:确认了netrin-4的神经突起导向功能.进一步通过对AP标签进行检测,发现netrin-4全长、LNT和NCT可与原代培养的神经元表面相结合,而EGFL不结合,说明神经元表面含有netrin-4受体或结合位点,且可能通过LNT和NCT结构域起作用.结论:netrin-4具有明确的神经突起导向功能,在神经元表面含有结合位点,同时发现碱性磷酸酶标签融合表达技术在真核基因功能研究方面具有一定优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王利红	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	13	71	6.0	7.0
2	张成岗	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	123	1156	18.0	28.0
3	高艳	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	19	134	6.0	11.0
4	秦树桐	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	4	9	2.0	3.0