蚯蚓纤溶酶新基因EfP-0的电子克隆及其编码区序列RT-PCR验证

• 作者: 崔大岺 耿风廷 赵晓瑜 高珊
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蚯蚓纤溶酶 电子克隆 EfP-0
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 897-901
• 页数: 5页
• 分类号: Q781|Q811.4
• 字数: 3607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.005

摘要

利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因.根据从粉正蚓(Lumbricus rubellus)中分离的F-Ⅰ-0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae 的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物, 经过RT-PCR,成功地从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为EfP-0.EfP-0基因全长678bp, 编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与F-Ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近.BLAST证明,EfP-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,GenBank 登录号为DQ836917.构建的pMAL-c2x-EfP-0重组质粒,在大肠杆菌TB1中获得融合蛋白MBP- EfP-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵晓瑜	河北大学生命科学学院	83	757	15.0	23.0
2	高珊	河北大学生命科学学院	7	63	3.0	7.0
3	崔大岺	河北大学生命科学学院	1	12	1.0	1.0
4	耿风廷	河北大学生命科学学院	6	60	3.0	6.0