抑癌蛋白PTEN的原核表达、抑癌活性研究和抗体制备

• 作者: 侯鑫 刘俊娥 扈廷茂
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PTEN 原核表达 抑癌活性 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 58-64
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 字数: 5828字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.01.009

摘要

PTEN是具有蛋白质和酯类双重特异性磷酸酶活性的抑癌蛋白,在肿瘤治疗中具有广阔的应用前景.鉴于原核表达PTEN蛋白并用于抑癌实验的研究尚未见报道,因此尝试利用大肠杆菌表达有活性的PTEN蛋白,检测其抑癌效果.利用本室克隆的PTEN基因cDNA和原核表达载体pET-44a(+)分别构建带6×His和Nus标签的两种诱导型原核融合表达载体pETPTEN和pET-Nus-PTEN,在不同的大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)(简写为BL)和Rosetta-gami(DE3)pLysS(简写为RG)中诱导表达.SDS-PAGE和Western blot检测表明:在可溶性组分和包涵体中均舍有目的蛋白,在BL中目的蛋白的表达量较高(18.7%)而在RG中可溶性蛋白的比例较高(6.6%).经纯化和包涵体蛋白复性处理后,重组融合蛋白经Chariot转运入小鼠实体瘤及人前列腺癌DU-145细胞.抑癌实验表明:与对照组相比,重组PTEN蛋白对小鼠实体瘤的生长抑制率为58.76%;对癌细胞DU-145的生长抑制率可达46.16%;并可导致明显的G0/G1期阻滞,其中在宿主RG中表达的重组蛋白抑癌效果明显高于BL宿主中表达的目的蛋白.证实在原核系统中表达的重组PTEN蛋白具有抑癌活性,同时制备了PTEN的高效价腹水多抗,为深入研究PTEN蛋白在癌症治疗中的应用打下了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	扈廷茂	内蒙古大学生命科学学院	49	330	10.0	16.0
2	侯鑫	内蒙古大学生命科学学院	19	289	8.0	16.0
3	刘俊娥	内蒙古大学生命科学学院	9	115	4.0	9.0