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摘要:
目的:克隆人乙醇脱氢酶ADH1C*1等位基因.方法:取人癌旁正常肝组织,用RT-PCR法获得ADH1C基因的cDNA,然后用双酶切得到目的基因并定向克隆到pUC19载体上.经过蓝白筛选后,用限制性酶谱和DNA测序以及BLAST对比分析进行鉴定.结果:①用RT-PCR方法扩增出与预期大小相符的ADH1C基因片段;②经蓝白筛选获得了带pUC19-ADH1C重组质粒的白色菌落;③用限制性酶谱和DNA测序并作BLAST分析证实pUC19-ADH1C*1重组质粒构建成功.结论:本实验构建的pUC19-ADH1C*1重组质粒,含有ADH1C*1结构基因的所有序列,与GeneBank数据库中的ADH1C基因的RefSeq序列比对,其碱基序列的一致性达到99%,氨基酸序列的一致性达到100%.在构建pUC19-ADH1C*1重组质粒时,采用双酶切的方法,可以很方便的定向克隆到真核表达载体中进行进一步的研究.
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文献信息
篇名 人乙醇脱氢酶ADH1C*1等位基因的克隆与鉴定
来源期刊 泸州医学院学报 学科 生物学
关键词 乙醇脱氢酶 ADH1C基因 基因克隆 序列分析
年,卷(期) 2006,(1) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 11-14
页数 4页 分类号 Q78
字数 2354字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-2669.2006.01.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李洪 泸州医学院生物化学教研室 77 290 8.0 13.0
2 曾凡才 泸州医学院生物化学教研室 26 70 5.0 6.0
3 吴民泸 泸州医学院生物化学教研室 6 19 2.0 4.0
4 邵军 泸州医学院生物化学教研室 8 30 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
乙醇脱氢酶
ADH1C基因
基因克隆
序列分析
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
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期刊影响力
西南医科大学学报
双月刊
2096-3351
51-1772/R
大16开
四川省泸州市龙马潭区香林路1段1号
1978
chi
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