人乙醇脱氢酶ADH1B2在毕赤酵母中的表达及活性分析

• 作者: 吉鹏飞 周亮 汤甜甜 鲍文娜 龚兴国
• 来源期刊: 浙江大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙醇脱氢酶 毕赤酵母 酶活性 活性氧化物(ROS) 谷胱甘肽(GSH) Akt
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 557-563
• 分类号: Q51
• 字数: 4838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9497.2012.05.013

摘要

根据GeneBank中人乙醇脱氢酶ADH1B2基因序列设计引物,以人肝脏总RNA为模板,反转录获得人乙醇脱氢酶基因.将克隆基因与表达载体pPICZB连接,测序正确的pPICZB-ADH1B2电转化毕赤酵母GS115;重组毕赤酵母工程菌经0.5％(υ/v)甲醇诱导72 h后目的蛋白以可溶形式表达,经DEAE- Sepharose FF纯化后蛋白酶活性可达8000 U·mg-1.同时构建重组质粒pCDNA3.1-ADHIB2转染HepG2人肝癌细胞,发现细胞内ROS/GSH水平降低,Akt磷酸化水平降低,细胞活性下降.为临床酒精中毒预防和治疗药物的研发以及ADH在肝脏肿瘤方面的研究提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚兴国	浙江大学生命科学学院生物化学研究所	44	908	15.0	29.0
2	汤甜甜	浙江大学生命科学学院生物化学研究所	3	6	1.0	2.0
3	周亮	浙江大学生命科学学院生物化学研究所	13	48	4.0	6.0
4	吉鹏飞	浙江大学生命科学学院生物化学研究所	1	5	1.0	1.0
5	鲍文娜	浙江大学生命科学学院生物化学研究所	3	9	2.0	3.0