基于密码子优化的FAD依赖葡萄糖脱氢酶在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质

• 作者: 王玥 罗同阳 董聪 高庆华
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: FAD依赖的葡萄糖脱氢酶 密码子优化 重组毕赤酵母 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 114-120
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0941

摘要

旨在获得表达量高的FAD依赖的葡萄糖脱氢酶.通过FAD依赖的葡萄糖脱氢酶密码子优化,人工合成基因片段,构建重组表达载体pMD-GDH,转化毕赤酵母X33菌株后利用甲醇诱导培养实现分泌表达.结果显示,经试管水平筛选阳性转化子获得一株酶活高且稳定的重组菌株,在10 L发酵罐培养时经过136 h诱导培养,酶活达到257600 U/L.酶学性质分析表明,以葡萄糖为底物时最适温度和pH分别为55℃和7.0,在50℃下处理150 min仍有70％ 的活性,在pH 4-7范围内,37℃保温4 h,FAD-GDH仍能保持50％ 以上的活性.金属离子Cu2+对酶活抑制作用比较大.FAD-GDH的底物专一性较好,以葡萄糖为最适底物.经毕赤酵母密码子偏好性优化实现了FAD依赖的葡萄糖脱氢酶在毕赤酵母中的高效表达,为应用于血糖检测提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董聪	河北省科学院微生物研究所	1	0	0.0	0.0
2	高庆华	河北省科学院微生物研究所	1	0	0.0	0.0
3	王玥	河北省科学院微生物研究所	1	0	0.0	0.0
4	罗同阳	河北省科学院微生物研究所	1	0	0.0	0.0