土拨鼠白细胞介素15的克隆、表达和活性分析

• 作者: Beate Lohrengel Micheal Roggendorf 卢银平 杨东亮 王宝菊 陆蒙吉
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 土拨鼠 白细胞介素15
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 细胞因子
• 页码范围: 817-821
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4213字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2006.09.014

摘要

目的 对土拨鼠白细胞介素15(woodchuck interleukin 15,wIL-15)分子进行克隆、表达并鉴定其活性,为进一步研究IL-15在嗜肝病毒感染中的作用以及评价IL-15用于治疗慢性HBV感染奠定基础.方法 用IL-15的保守引物将wIL-15基因克隆、测序并进行分析,构建wIL-15的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达,分离纯化后用淋巴细胞增殖试验检测其生物学活性.结果 wIL-15的完整编码序列为489 nt(与其他哺乳动物IL-15编码序列的同源性高达78%～87%),编码162 AA长度的前体蛋白(与其他哺乳动物IL-15蛋白的同源性高达70%～80%),其信号肽为N端的48 AA,成熟蛋白由114 AA组成.土拨鼠IL-15与灵长动物IL-15的同源性高于啮齿动物.带有His-tag的成熟蛋白,可以在大肠杆菌中表达,分离纯化后,可以刺激Con A活化的小鼠脾细胞和土拨鼠PBMC增殖(其SI值可高达10以上),并存在明显的剂量依赖性.结论 (1)wIL-15与其他哺乳动物IL-15高度同源,并且与灵长类动物的IL-15更接近.(2)wIL-15可以在大肠杆菌中表达,并在纯化后能刺激小鼠和土拨鼠淋巴细胞增殖,表现出较好的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆蒙吉	德国埃森大学病毒学研究所	6	8	2.0	2.0
2	Beate Lohrengel	德国埃森大学病毒学研究所	1	1	1.0	1.0
3	Micheal Roggendorf	德国埃森大学病毒学研究所	1	1	1.0	1.0