山地乌骨鸡IL-2、IL-15、IL-18及IFN-γ真核表达载体构建及其对IBV DNA疫苗免疫增强作用研究

• 作者: 周生 徐永莉 李晓英 柳萍 王红宁 胡慧琼 黄勇
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 农学
• 关键词: 山地乌骨鸡 白细胞介素2 白细胞介素15 白细胞介素18 γ-干扰素 真核表达载体 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1056-1062
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 字数: 6160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2006.10.015

摘要

利用RT-PCR法从刺激的山地乌骨鸡的外周淋巴细胞及脾脏组织总RNA中扩增出与鸡IL-2、IL-15、IL-18及IFN-γ基因预期大小的DNA片段,并与pcDNA3.1连接构建了真核表达质粒pDNAIL2、pDNAIL15、pDNAIL18及pDNAIFN-γ.研制了4种分子免疫佐剂,对通过检测血清总IgG值、CD4+、CD8+百分含量,研究了４种分子免疫佐剂对禽传染性支气管炎DNA疫苗的免疫增强作用.并对pDNAIL2在鸡胚成纤维细胞中的表达进行了研究.研究发现,所有分子佐剂和DNA疫苗联合接种试验组鸡血清总IgG值、CD4+T及CD8+T淋巴细胞含量从5天后就一直高于DNA疫苗单独注射组,并在15天和21天时出现差异显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01).结果表明,IL-2、IL-15、IL-18及IFN-γ对IBV DNA疫苗有免疫增强作用,且pDNAIL2在体外得到了表达.