内江猪IL-15基因的表达与免疫增强作用研究

• 作者: 张博 徐志文 朱玲 林华 王印 王小玉 郭万柱 韩国全
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 内江猪 白细胞介素15基因 分子克隆 表达 免疫增强作用
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 543-549
• 页数: 7页
• 分类号: S852.42
• 字数: 6683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.06.014

摘要

参照GenBank中猪IL-15基因的mRNA序列设计1对特异性引物,从经由刀豆蛋白A诱导培养的内江猪外周血淋巴细胞扩增猪IL-15基因;构建其成熟肽原核表达载体pMAL-pIL-15,在Rosetta(DE3)pLysS中表达;构建其真核表达载体pCI-pIL-15,与pCI-gD(PRV)联合免疫雌性BALB/c小鼠以研究其免疫增强作用.测序结果显示,内江猪IL-15基因与发表的猪IL-15基因的核苷酸同源性为97%～99%,含489 bp的完整开放阅读框.SDS-PAGE分析显示,表达的融合蛋白约为52.5 ku,约占菌体总蛋白的27%.Western-blot检测显示,所表达的融合蛋白为麦芽糖结合蛋白的融合蛋白.MTT法试验证实,该融合表达产物经初步纯化、透析复性后,可明显增强淋巴细胞增殖;小鼠免疫试验显示,pCI-pIL～15能够促进小鼠脾CD4+、CD8+T细胞增殖,加强PRV-gD基因疫苗特异性中和抗体的产生.